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Genes de regulação do ciclo celular

A divisão celular é governada por um oscilador bioquímico construído a partir de quinases dependentes de ciclina (CDKs) e suas subunidades reguladoras de ciclina, opostas por inibidores de CDK (CKIs) e proteínas de checkpoint. O ponto de restrição G1/S – o compromisso irreversível com a divisão celular – é a decisão celular mais universalmente visada na oncogénese, interrompida em praticamente todos os cancros humanos através de um de vários mecanismos alternativos: amplificação de CDK4, sobre-expressão de ciclina D1, deleção de p16INK4a (CDKN2A) ou perda de RB1. A compreensão desta via revela por que os inibidores de CDK4/6 funcionam e quais biomarcadores predizem resistência.

Resposta Rápida

Durante G1, os sinais antimitogênicos mantêm o pRb em seu estado hipofosforilado, repressor de E2F. Sinais mitogênicos (RAS, WNT, PI3K) induzem o acúmulo de ciclina D1, que se monta com CDK4/CDK6 e é ativada pela alça T por CAK. A CDK4 / 6 – ciclina D inicialmente fosforila o pRb em Ser780, desreprimindo parcialmente os alvos E2F, incluindo a ciclina E. A CDK2 – ciclina E então hiperfosforila o pRb, completando a liberação de E2F e constituindo o cruzamento do ponto de restrição. Essa opção biestável garante que o comprometimento da divisão seja irreversível, uma vez ultrapassado.

Visão Geral do Mecanismo

Durante G1, os sinais antimitogênicos mantêm o pRb em seu estado hipofosforilado, repressor de E2F. Sinais mitogênicos (RAS, WNT, PI3K) induzem o acúmulo de ciclina D1, que se monta com CDK4/CDK6 e é ativada pela alça T por CAK. A CDK4 / 6 – ciclina D inicialmente fosforila o pRb em Ser780, desreprimindo parcialmente os alvos E2F, incluindo a ciclina E. A CDK2 – ciclina E então hiperfosforila o pRb, completando a liberação de E2F e constituindo o cruzamento do ponto de restrição. Essa opção biestável garante que o comprometimento da divisão seja irreversível, uma vez ultrapassado.

Transição G1→S do Ciclo Celular

Sinais mitogênicosfatores de crescimento · RASCiclina D/CDK4/6Complexo G1 quinasepRb (fosforilado)inativadoE2F1/2/3fatores de transcriçãoCiclina E/CDK2Entrada da Fase Sp16/CDKN2Ap21/CDKN1Ainduzido por p53
quinase/sinalizaçãooncogenesupressor de tumorsaída celularinibe

Caminho passo a passo

1
Sinal mitogênico para indução de ciclina D1

Fatores de crescimento ativam as vias RAS/MAPK e PI3K/AKT. ERK e MYC regulam transcricionalmente CCND1 (ciclina D1); AKT fosforila e inativa a GSK3β, evitando a degradação da ciclina D1. A proteína ciclina D1 se acumula dentro de 4–6 horas após a estimulação mitogênica.

2
Conjunto do Complexo CDK4/6–Ciclina D

A ciclina D1 se liga a CDK4 ou CDK6, ativando parcialmente a quinase. CAK (CDK7 – ciclina H) fosforila CDK4 em Thr172 para ativação completa da quinase. p21 e p27 atuam como fatores de montagem nesta fase, não como inibidores.

3
Fosforilação inicial de pRb

CDK4/6 – ciclina D fosforila pRb em Ser780 (específico para CDK4). Isso interrompe a ligação do corepressor pRb-HDAC, iniciando a desrepressão parcial de E2F e a transcrição de genes alvo de E2F, incluindo ciclina E e CDK2.

4
Feedback Positivo CDK2–Ciclina E e Ponto de Restrição

CDK2-ciclina E recentemente sintetizada hiperfosforila pRb em Ser795/811/821, liberando completamente todos os fatores de transcrição E2F ligados. Isto cria um ciclo de feedback positivo (E2F impulsiona mais ciclina E, mais atividade de CDK2, mais fosforilação de pRb) que torna o compromisso irreversível – o ponto de restrição.

5
Entrada da Fase S

O E2F1/2/3 liberado ativa transcricionalmente o programa completo da fase S: ciclina A, PCNA, complexo de helicase MCM2-7, RRM1/2 e componentes δ da DNA polimerase. CDK2 – ciclina A substitui CDK2 – ciclina E para impulsionar a progressão da fase S.

6
p16INK4a como o freio G1

p16INK4a (codificado por CDKN2A) desloca competitivamente a ciclina D de CDK4/6, evitando a fosforilação da alça T. p16 é induzido por estresse oncogênico (senescência), dano ao DNA (indiretamente) e quiescência. A exclusão de CDKN2A ou a inativação de RB1 ignora totalmente esse freio.

Relevância da Doença

O eixo da ciclina D–CDK4/6–RB é alterado através de diferentes mecanismos no câncer, incluindo amplificação de CDK4 ou CCND1, perda de CDKN2A e inativação de RB1. Os inibidores de CDK4/6 têm evidências específicas da população e do regime no câncer de mama com receptor hormonal positivo e HER2 negativo. A resistência é heterogênea e pode envolver perda de RB1, alterações de ciclina-CDK ou sinalização proliferativa alternativa; uma estimativa de prevalência não deve ser aplicada em contextos de drogas e doenças.

Implicações terapêuticas

Os inibidores de CDK4/6 são o paradigma da terapia direcionada ao ciclo celular e requerem um gene RB1 intacto para eficácia. Abemaciclib tem atividade adicional de CDK2/CDK9 e pode reter atividade parcial em alguns tumores RB1 intactos com resistência não clássica. Abordagens emergentes incluem inibidores de CDK2 (direcionados à ciclina E – CDK2 após resistência ao inibidor de CDK4/6) e inibidores de CDK tricomplexos direcionados a CDK4/ciclina D especificamente sobre outros CDKs.

Perguntas Comuns

Por que a perda de RB1 pode reduzir a sensibilidade aos inibidores de CDK4/6?

Os inibidores de CDK4/6 dependem de pRb funcional para restringir E2F e manter a parada G1. A perda bialélica de RB1 remove esse efetor a jusante e é um mecanismo de resistência biologicamente forte. A interpretação clínica ainda depende de como o RB1 foi avaliado, da clonalidade, do cenário da doença e de outras alterações do ciclo celular, e não apenas da palavra “perda”.

Qual é o ponto de restrição e por que ele é relevante para o câncer?

O ponto de restrição é o momento G1 de comprometimento irreversível com a divisão celular, definido pela hiperfosforilação de pRb e liberação completa de E2F. Antes do ponto de restrição, as células necessitam de sinais mitogênicos sustentados; depois disso, eles se dividem de forma autônoma. As células cancerígenas contornam o ponto de restrição constitutivamente através da amplificação de CDK4, superexpressão de ciclina D, perda de CDKN2A ou inativação de RB1.

Como o p53 impõe o ponto de verificação G1?

Após dano ao DNA, a fosforilação de p53 mediada por ATM/CHK2 estabiliza p53, que ativa transcricionalmente CDKN1A (codificando p21). p21 inibe os complexos CDK2/ciclina E e CDK4/ciclina D, prevenindo a fosforilação de pRb e mantendo a parada G1. Isto dá à célula tempo para reparar o DNA antes de passar para a fase S – quando a replicação amplificaria quaisquer mutações.

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Referências

  1. 1Malumbres M, Barbacid M (2009). Ciclo celular, CDKs e câncer: um paradigma em mudança. Nat Rev Câncer. PubMed 19238148
  2. 2Sherr CJ, Roberts JM (2004). Viver com ou sem ciclinas e quinases dependentes de ciclina. Desenvolvimento de genes. PubMed 14672986
  3. 3Hanahan D, Weinberg RA (2011). Marcas do Câncer: A Próxima Geração. Célula. PubMed 22081689
  4. 4Finn RS, et al. (2016). Palbociclib e Letrozol em Câncer de Mama Avançado. N Engl J Med. PubMed 26928463