BRAF V600E 在癌症中的作用：机制和靶向治疗

V600E 分子机制：组成单体活性

野生型 BRAF 通常受到与激酶结构域接触的 N 末端调节区域的自抑制，并且需要与 CRAF 或另一个 BRAF 分子二聚化才能完全激活。 V600E 突变在包含 DFG 的激活环内的位置 600 处插入带负电荷的谷氨酸残基，模仿通常需要上游 RAS 输入的磷酸化依赖性激活。这种结构模拟稳定了“活性”DFG-in 激酶构象，使 BRAF V600E 作为单体发出信号。

BRAF V600E 的单体活性性质具有药理学后果：第一代 BRAF 抑制剂可以优先抑制突变单体。在具有上游 RAS 活性的细胞中，RAF 抑制剂反而可以促进 RAF 二聚体内的反式激活并增强 ERK 信号传导。这种矛盾的激活有助于解释一些毒性以及为什么在规定的环境中使用联合策略，但治疗要求仍然针对标签和疾病。

BRAF V600E 跨癌症类型和治疗反应

BRAF V600E 在多个分子亚组中很常见，包括皮肤黑色素瘤、甲状腺乳头状癌和毛细胞白血病，并且出现在较小的结直肠癌亚组中。频率估计因组织学、分类和队列而异。尽管氨基酸变化相同，但治疗反应也因谱系而异。在结直肠癌中，EGFR 介导的反馈有助于解释单独 BRAF 抑制的有限活性以及 BRAF 加 EGFR 指导组合的研究。

黑色素瘤对 BRAF/MEK 抑制剂的耐药性是通过多种机制产生的：MAPK 重新激活（二次 NRAS 突变、KRAS 突变、MEK1/MEK2 突变、BRAF V600E 扩增、BRAF 选择性剪接）、通过 PI3K/AKT/mTOR 的旁路信号传导以及组织学转化。目前正在探索三联体组合（BRAF + MEK + 抗 PD1），通过同时靶向致癌信号和恢复免疫监视来延迟耐药性。

BRAF 融合和非 V600 改造

除了 V600E 之外，2 类 BRAF 突变和融合可以作为 RAS 独立二聚体发出信号，使其生物学不同于 1 类 V600 单体。 KIAA1549-BRAF 在儿科低级别胶质瘤中复发，但融合伙伴、肿瘤背景和当前产品标签都很重要； BRAF 融合不应被解释为 V600E。

3 类 BRAF 变体的激酶活性受损或较低，并且可能依赖于上游 RAS 活性和 RAF 二聚体。这种生物学与 V600E 不同，但它并没有创建一种与肿瘤无关的 MEK 抑制剂规则。泛 RAF、RAF 二聚体和下游策略仍然依赖于变异、谱系和临床证据。

要点

• ·BRAF V600E 模拟激活环磷酸化，稳定激酶中的活性 DFG 构象，并实现组成型单体信号传导，无需 RAS 或二聚化（这是第一代 BRAF 选择性抑制剂所利用的机制）。
• ·RAF 抑制剂的作用取决于二聚体状态和上游 RAS 活性；组合要求应取自当前特定疾病的标签或指南。
• ·反应和耐药因肿瘤谱系而异，EGFR 反馈在 BRAF V600E 结直肠癌中尤其重要。
• ·BRAF V600E 发生在黑色素瘤、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌、脑癌和血液癌中，但不同谱系的患病率和治疗证据存在很大差异。
• ·BRAF 融合（例如 KIAA1549-BRAF）通过不同的二聚体依赖性机制激活信号传导，不应解释为 V600E。