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Reguladores de la apoptosis

La apoptosis (muerte celular programada) es el mecanismo supresor de tumores definitivo de la célula, que elimina las células con daños irreparables en el ADN, mutaciones oncogénicas o señalización aberrante. La vía de apoptosis intrínseca (mitocondrial) se rige por un equilibrio dinámico entre las proteínas antiapoptóticas de la familia BCL2 (BCL2, BCL-XL, MCL1) y sus contrapartes proapoptóticas (BAX, BAK, BIM, PUMA, NOXA). Las células cancerosas explotan este equilibrio con extraordinaria sofisticación: la sobreexpresión de BCL2, la amplificación de MCL1, la mutación de p53 y la hiperactivación de AKT inclinan la balanza hacia la supervivencia, creando a menudo dependencias dirigidas a proteínas antiapoptóticas específicas.

Respuesta Rápida

La decisión de someterse a apoptosis intrínseca se toma en la membrana mitocondrial externa (OMM). Las proteínas antiapoptóticas de la familia BCL2 (BCL2, BCL-XL, MCL1) secuestran proteínas proapoptóticas en su surco hidrofóbico de unión a BH3. Cuando las señales de estrés superan un umbral, las proteínas exclusivas de BH3 (BIM, PUMA, BAD, NOXA) abruman la capacidad de secuestro de BCL2/BCL-XL, liberando a BAX/BAK para que se oligomerice y forme poros en el OMM. Esta permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MOMP) libera citocromo c, lo que desencadena la formación de apoptosomas y la activación de la cascada de caspasas, una puerta unidireccional hacia la demolición celular.

Descripción general del mecanismo

La decisión de someterse a apoptosis intrínseca se toma en la membrana mitocondrial externa (OMM). Las proteínas antiapoptóticas de la familia BCL2 (BCL2, BCL-XL, MCL1) secuestran proteínas proapoptóticas en su surco hidrofóbico de unión a BH3. Cuando las señales de estrés superan un umbral, las proteínas exclusivas de BH3 (BIM, PUMA, BAD, NOXA) abruman la capacidad de secuestro de BCL2/BCL-XL, liberando a BAX/BAK para que se oligomerice y forme poros en el OMM. Esta permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MOMP) libera citocromo c, lo que desencadena la formación de apoptosomas y la activación de la cascada de caspasas, una puerta unidireccional hacia la demolición celular.

Vía de apoptosis intrínseca

Estrés Celular/Daño al ADNBIM · PUMA · NOXAProteínas sólo BH3BAX / BAKefectores formadores de porosCitocromo cliberación mitocondrialApaf-1 · Caspasa-9apoptosomaCaspasa-3/7muerte celularBCL2 / BCL-XLantiapoptótico
quinasa/señalizaciónoncogénsupresor de tumoressalida celularinhibe

Camino paso a paso

1
Reóstato de la familia BCL2 en las mitocondrias

Los antiapoptóticos BCL2, BCL-XL y MCL1 ocupan el OMM a través de hélices transmembrana C-terminales. Sus surcos hidrofóbicos de unión a BH3 secuestran monómeros BAX proapoptóticos y proteínas exclusivas de BH3 (BIM, PUMA, BAD, NOXA), previniendo la formación espontánea de poros mitocondriales.

2
La señal de estrés amplifica las proteínas exclusivas de BH3

El daño en el ADN impulsa la transcripción mediada por p53 de PUMA (BBC3) y NOXA (PMAIP1). La retirada del factor de crecimiento reduce la fosforilación de BAD mediada por AKT, liberando BAD activo. La activación de oncogenes (MYC) regula positivamente la transcripción de BIM. Estas proteínas exclusivas de BH3 superan la capacidad de unión de BCL2/BCL-XL.

3
Activación BAX/BAK y MOMP

Las proteínas exclusivas de BH3 no secuestradas y las proteínas 'activadoras' (tBID, BIM) contactan directamente con BAX y BAK, induciendo cambios conformacionales que exponen sus dominios transmembrana. BAX/BAK se oligomeriza en poros lipídicos en el OMM (permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MOMP), un compromiso irreversible con la apoptosis.

4
Liberación del citocromo c y apoptosoma

MOMP libera citocromo c, SMAC/DIABLO, HTRA2/Omi y AIF del espacio intermembrana. El citocromo c se une a APAF1, que (con dATP) se oligomeriza en una rueda heptamérica: el apoptosoma. El apoptosoma recluta y activa pro-caspasa-9.

5
Ejecución en cascada de caspasa

La caspasa-9 activa escinde y activa las caspasas efectoras-3 y -7. La caspasa-3 escinde >500 sustratos celulares, incluidos PARP1, láminas, β-actina y CAD (DNasa activada por caspasa). CAD fragmenta el ADN nuclear en los conectores internucleosomales, produciendo la escalera de ADN característica de la apoptosis.

6
Anulación de supervivencia mediada por AKT

La AKT constitutivamente activa fosforila BAD (Ser136), manteniendo el secuestro de BAD-14-3-3 y previniendo el desplazamiento de BCL2. AKT también degrada p53 a través de MDM2, suprimiendo la transcripción de PUMA y NOXA. Por lo tanto, la pérdida de PTEN crea una profunda resistencia apoptótica a través de la actividad constitutiva de AKT.

Relevancia de la enfermedad

Algunas neoplasias malignas hematológicas dependen en gran medida de BCL2 porque las proteínas proapoptóticas están secuestradas cerca del umbral de muerte mitocondrial. Otros tumores dependen más de MCL1, BCL-XL o de varias proteínas a la vez, y la expresión no revela automáticamente dependencia. La pérdida de TP53 puede alterar la apoptosis inducida por estrés en algunos contextos, pero no hace que todos los tumores con mutaciones de TP53 sean ampliamente resistentes a la quimioterapia.

Implicaciones terapéuticas

Venetoclax es un mimético de BH3 dirigido a BCL2 con usos actuales etiquetados por la FDA en poblaciones definidas de CLL/SLL y, en combinación, en una población definida de AML recién diagnosticada; no está aprobado por la FDA para el mieloma múltiple. El perfil de BH3 mide la respuesta mitocondrial a péptidos seleccionados y es principalmente un ensayo de investigación y traslación más que un predictor clínico universal. Los agentes dirigidos a MCL1, BCL-XL o múltiples proteínas antiapoptóticas siguen siendo específicos de la indicación y del ensayo.

Preguntas comunes

¿Qué es MOMP y por qué es el punto de no retorno en la apoptosis?

MOMP (permeabilización de la membrana externa mitocondrial) es la formación de poros BAX/BAK en la membrana mitocondrial externa. Una vez que se produce MOMP, se libera el citocromo c y el apoptosoma se ensambla de manera irreversible. Incluso si las caspasas se inhiben después de MOMP, las células sufren una muerte independiente de caspasas a través de AIF y EndoG. Esto convierte a MOMP en el evento de compromiso apoptótico irreversible.

¿Por qué las células que sobreexpresan MYC necesitan BCL2 para sobrevivir?

La sobreexpresión de MYC activa paradójicamente el programa apoptótico como una salvaguardia supresora de tumores, a través de la estabilización de p53 mediada por ARF y la regulación positiva directa de BIM. Para que las células cancerosas impulsadas por MYC sobrevivan a esta apoptosis inducida por oncogén, deben adquirir conjuntamente la sobreexpresión de BCL2, la pérdida de p53 o la amplificación de MCL1 para suprimir la cascada apoptótica, lo que explica la coexistencia de alteraciones de MYC y BCL2 en linfomas agresivos de células B.

¿Cómo actúa venetoclax tan rápidamente en algunos pacientes?

Venetoclax actúa instantáneamente porque ocupa directamente el surco hidrofóbico de BCL2, liberando proteínas precargadas solo de BH3 (particularmente BIM) que ya están unidas a BCL2 en células tumorales preparadas. En la LLC altamente dependiente de BCL2, las mitocondrias están "preparadas para la muerte" (saturadas con proteínas proapoptóticas unidas) y solo requieren el desplazamiento del tapón de BCL2 para desencadenar la liberación instantánea de citocromo c y la activación de caspasa.

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Referencias

  1. 1Czabotar PE, et al. (2014). Control de la apoptosis por la familia de proteínas BCL-2: implicaciones para la fisiología y la terapia. Nat Rev Mol Cell Biol. PubMed 24452072
  2. 2Tait SW, Verde DR (2010). Mitocondrias y muerte celular: permeabilización de la membrana externa y más allá. Nat Rev Mol Cell Biol. PubMed 20981003
  3. 3Delbridge AR, et al. (2016). Treinta años de BCL-2: traducir los descubrimientos de la muerte celular en nuevas terapias contra el cáncer. Cáncer Rev. Nacional. PubMed 29140520
  4. 4Bhola PD, Bhatt DL, et al. (2019). Venetoclax en combinación con agentes hipometilantes: evidencia clínica y justificación biológica. Leucemia. PubMed 26361258