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Biología CelularGuía de piedra angular

Genes reguladores del ciclo celular

La división celular se rige por un oscilador bioquímico construido a partir de quinasas dependientes de ciclina (CDK) y sus subunidades reguladoras de ciclina, al que se oponen los inhibidores de CDK (CKI) y las proteínas de punto de control. El punto de restricción G1/S (el compromiso irreversible con la división celular) es la decisión celular más universalmente dirigida en la oncogénesis, interrumpida en prácticamente todos los cánceres humanos a través de uno de varios mecanismos alternativos: amplificación de CDK4, sobreexpresión de ciclina D1, deleción de p16INK4a (CDKN2A) o pérdida de RB1. Comprender esta vía revela por qué funcionan los inhibidores de CDK4/6 y qué biomarcadores predicen la resistencia.

Respuesta Rápida

Durante G1, las señales antimitogénicas mantienen a pRb en ​​su estado hipofosforilado que reprime E2F. Las señales mitogénicas (RAS, WNT, PI3K) inducen la acumulación de ciclina D1, que se ensambla con CDK4/CDK6 y es activada por el bucle T mediante CAK. CDK4/6-ciclina D inicialmente fosforila pRb en ​​Ser780, desreprimiendo parcialmente los objetivos de E2F, incluida la ciclina E. CDK2-ciclina E luego hiperfosforila pRb, completando la liberación de E2F y constituyendo el cruce del punto de restricción. Este interruptor biestable garantiza que el compromiso de división sea irreversible una vez cruzado.

Descripción general del mecanismo

Durante G1, las señales antimitogénicas mantienen a pRb en ​​su estado hipofosforilado que reprime E2F. Las señales mitogénicas (RAS, WNT, PI3K) inducen la acumulación de ciclina D1, que se ensambla con CDK4/CDK6 y es activada por el bucle T mediante CAK. CDK4/6-ciclina D inicialmente fosforila pRb en ​​Ser780, desreprimiendo parcialmente los objetivos de E2F, incluida la ciclina E. CDK2-ciclina E luego hiperfosforila pRb, completando la liberación de E2F y constituyendo el cruce del punto de restricción. Este interruptor biestable garantiza que el compromiso de división sea irreversible una vez cruzado.

Transición del ciclo celular G1→S

Señales mitogénicasfactores de crecimiento · RASCiclina D/CDK4/6Complejo quinasa G1pRb (fosforilada)inactivadoE2F1/2/3factores de transcripciónCiclina E/CDK2Entrada de fase Sp16/CDKN2Ap21/CDKN1Ainducida por p53
quinasa/señalizaciónoncogénsupresor de tumoressalida celularinhibe

Camino paso a paso

1
Señal mitogénica para la inducción de ciclina D1

Los factores de crecimiento activan las vías RAS/MAPK y PI3K/AKT. ERK y MYC regulan positivamente transcripcionalmente CCND1 (ciclina D1); AKT fosforila e inactiva GSK3β, previniendo la degradación de la ciclina D1. La proteína ciclina D1 se acumula entre 4 y 6 horas después de la estimulación mitogénica.

2
CDK4/6–Ensamblaje del complejo de ciclina D

La ciclina D1 se une a CDK4 o CDK6, activando parcialmente la quinasa. CAK (CDK7-ciclina H) fosforila CDK4 en Thr172 para la activación completa de la quinasa. p21 y p27 actúan como factores de ensamblaje en esta etapa, no como inhibidores.

3
Fosforilación inicial de pRb

CDK4/6-ciclina D fosforila pRb en ​​Ser780 (específico de CDK4). Esto interrumpe la unión del correpresor pRb-HDAC, iniciando la desrepresión parcial de E2F y la transcripción de genes diana de E2F, incluidos ciclina E y CDK2.

4
CDK2–Ciclina E Retroalimentación positiva y punto de restricción

La CDK2-ciclina E recién sintetizada hiperfosforila pRb en ​​Ser795/811/821, liberando completamente todos los factores de transcripción E2F unidos. Esto crea un circuito de retroalimentación positiva (E2F impulsa más ciclina E, más actividad de CDK2, más fosforilación de pRb) que hace que el compromiso sea irreversible: el punto de restricción.

5
Entrada de fase S

El E2F1/2/3 liberado activa transcripcionalmente el programa completo de la fase S: componentes ciclina A, PCNA, complejo de helicasa MCM2-7, RRM1/2 y ADN polimerasa δ. CDK2-ciclina A reemplaza a CDK2-ciclina E para impulsar la progresión de la fase S.

6
p16INK4a como freno G1

p16INK4a (codificado por CDKN2A) desplaza competitivamente la ciclina D de CDK4/6, evitando la fosforilación del bucle T. p16 es inducido por estrés oncogénico (senescencia), daño al ADN (indirectamente) y en reposo. La eliminación de CDKN2A o la desactivación de RB1 evita este freno por completo.

Relevancia de la enfermedad

El eje ciclina D-CDK4/6-RB se altera a través de diferentes mecanismos en el cáncer, incluida la amplificación de CDK4 o CCND1, la pérdida de CDKN2A y la inactivación de RB1. Los inhibidores de CDK4/6 tienen evidencia específica de población y régimen en el cáncer de mama con receptores hormonales positivos y HER2 negativo. La resistencia es heterogénea y puede implicar pérdida de RB1, cambios de ciclina-CDK o señalización proliferativa alternativa; No se debe aplicar una estimación de prevalencia en todos los entornos de drogas y enfermedades.

Implicaciones terapéuticas

Los inhibidores de CDK4/6 son el paradigma de la terapia dirigida al ciclo celular y requieren un gen RB1 intacto para ser eficaces. Abemaciclib tiene actividad CDK2/CDK9 adicional y puede conservar actividad parcial en algunos tumores RB1 intactos con resistencia no clásica. Los enfoques emergentes incluyen inhibidores de CDK2 (dirigidos a ciclina E-CDK2 después de la resistencia a inhibidores de CDK4/6) e inhibidores de CDK tricomplejos dirigidos a CDK4/ciclina D específicamente sobre otros CDK.

Preguntas comunes

¿Por qué la pérdida de RB1 puede reducir la sensibilidad a los inhibidores de CDK4/6?

Los inhibidores de CDK4/6 dependen de pRb funcional para restringir E2F y mantener la detención de G1. La pérdida bialélica de RB1 elimina ese efector posterior y es un mecanismo de resistencia biológicamente fuerte. La interpretación clínica todavía depende de cómo se evaluó RB1, la clonalidad, el entorno de la enfermedad y otras alteraciones del ciclo celular, más que de la palabra "pérdida" sola.

¿Cuál es el punto de restricción y por qué es relevante para el cáncer?

El punto de restricción es el momento G1 de compromiso irreversible con la división celular, definido por la hiperfosforilación de pRb y la liberación completa de E2F. Antes del punto de restricción, las células requieren señales mitogénicas sostenidas; después de ello, se dividen de forma autónoma. Las células cancerosas evitan el punto de restricción de forma constitutiva mediante la amplificación de CDK4, la sobreexpresión de ciclina D, la pérdida de CDKN2A o la inactivación de RB1.

¿Cómo aplica p53 el punto de control G1?

Después del daño en el ADN, la fosforilación de p53 mediada por ATM/CHK2 estabiliza p53, que activa transcripcionalmente CDKN1A (que codifica p21). p21 inhibe los complejos CDK2/ciclina E y CDK4/ciclina D, previniendo la fosforilación de pRb y manteniendo la detención de G1. Esto le da a la célula tiempo para reparar el ADN antes de comprometerse con la fase S, cuando la replicación amplificaría cualquier mutación.

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Referencias

  1. 1Malumbres M, Barbacid M (2009). Ciclo celular, CDK y cáncer: un paradigma cambiante. Cáncer Rev. Nacional. PubMed 19238148
  2. 2Sherr CJ, Roberts JM (2004). Vivir con o sin ciclinas y quinasas dependientes de ciclinas. Desarrollador de genes. PubMed 14672986
  3. 3Hanahan D, Weinberg RA (2011). Características del cáncer: la próxima generación. Celda. PubMed 22081689
  4. 4Finn RS, et al. (2016). Palbociclib y letrozol en cáncer de mama avanzado. N Inglés J Med. PubMed 26928463